Patil, J. R., Jayaprakasha, G. K., Murthy, K. C., Chetti, M. B., & Patil, B. S. (2010). Characterization of Citrus aurantifolia bioactive compounds and their inhibition of human pancreatic cancer cells through apoptosis. Microchemical Journal, 94(2), 108-117.

En el presente estudio, hemos aislado y purificado cinco compuestos putativos a partir de semillas de lima ( Citrus aurantifolia Swingle) utilizando la extracción Soxhlet y la separación cromatográfica. 

La pureza y las estructuras de los compuestos aislados se identificaron mediante TLC, HPLC y espectros de masas como limonina, ácido limonexic (LNA), ácido isolimonexic (ILNA), glucósido de β-sitosterol (SG) y glucósido de limonina (LG). 

Estos supuestos compuestos mostraron una inhibición significativa de las células Panc-28 con valores de CI 50 en el rango de 18–42 µM en el ensayo MTT después de la incubación durante 72 h, lo que fue confirmado por el recuento de células viables. Además, la inducción de la apoptosis se confirmó mediante la tinción con anexina-FITC de las células y también se estudió la expresión de proteínas relacionadas con la apoptosis para comprender el mecanismo. La expresión de la proteína relacionada con la apoptosis mostró apoptosis a través de la inducción de p53 por la manera dependiente de p21 y la vía intrínseca dirigida por caspasas mediadas por citocromo c . La expresión de la apoptosis que favorece a las proteínas en células tratadas con compuestos aislados fue del orden de ILNA > LNA > SG > Limonina > LG basada en la relación de expresión de bax / bcl2. 

Estos resultados se apoyaron aún más a través de imágenes microscópicas de sondas fluorescentes. Según nuestro conocimiento, este es el primer informe sobre el aislamiento y la identificación de LNA, SG y LG a partir de la lima y su mecanismo de inhibición de células de cáncer pancreático humano.